分析测试技术之二：化学分析实验方法
竞赛项目：乙二胺四乙酸标准滴定溶液的标定及样品中碳酸钙含量的测定
说明
1、本题满分100分，完成时间180分钟。
2、考核成绩为操作过程评分、测定结果评分和考核时间评分之和。
3、全部操作过程时间和结果处理时间计入时间限额。
一、EDTA标准滴定溶液的标定
精密称取1份在110℃干燥过的CaCO3基准试剂约0.5 g（精确到0.0001g）于50 ml烧杯中，用少量水润湿，用滴管滴加6 mol/L HCl至CaCO3完全溶解（加热至沸），把全部溶液定量地转入250 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，备用。
移取25.00mL置于250mL锥形瓶中，加5 mL三乙醇胺（1+3）溶液和25 mL水，氢氧化钠（100g/L）溶液20 mL，加入少量钙羧酸混合指示剂，此时溶液显酒红色，用0.02 mol/L的乙二胺四乙酸二钠标准溶液(EDTA)滴定至溶液由酒红色变为纯蓝色，每份平行测定3次，同时作空白试验. MCaCO3=100.00 g/mol。
式中：CEDTA——EDTA标准滴定溶液的浓度，mol/L；
VEDTA——滴定时消耗EDTA标准滴定溶液的体积，mL；
m基——所称基准物CaCO3的质量，g；
MCaCO3——CaCO3的摩尔质量，100.00 g/mol。
二、CaCO3含量的测定
精密称取1份约1.0 g在105~110℃下烘至恒重的样品（精确到0.0001 g）置于小烧杯中，用少量水润湿，缓缓加入盐酸（1+1）溶液至试样完全溶解，移入250 mL容量瓶中（必要时可用中速滤纸过滤，滤液和洗液一并移入容量瓶）加水至刻度，摇匀。移取25.00 mL置于250 mL锥形瓶中，加5 mL三乙醇胺（1+3）溶液和25 mL水，氢氧化钠（100 g/L）溶液20mL，加入少量钙羧酸混合指示剂，此时溶液显酒红色，用0.02 mol/L的乙二胺四乙酸二钠标准溶液(EDTA)滴定至溶液由酒红色变为纯蓝色，每份平行测定3次，同时作空白试验。
式中：CaCO3%——样品中CaCO3的含量，%；
CEDTA——EDTA标准滴定溶液的浓度，mol/L；
VEDTA——滴定时消耗EDTA标准滴定溶液的体积，mL；
m样品 ——样品的质量，g；
MCaCO3——CaCO3的摩尔质量，100.0 g/mol
分析测试技术竞赛之三：仪器分析实验方法
竞赛项目：紫外分光光度法测定有机化合物的定性和定量分析
说明
1、本题满分100分，完成时间180分钟。
2、考核成绩为操作过程评分、测定结果评分和考核时间评分之和。
3、全部操作过程时间和结果处理时间计入时间限额。
一、未知物的定性分析
将标准溶液和未知液均配成一浓度为1~10 µg/mL范围内的溶液(配制方法由选手自定)，以水定容并摇匀。于波长200～350 nm范围内测定三种溶液吸光度，并作吸收曲线，要求对吸收曲线中的重要峰值点的左右处增加吸光度值测定。根据吸收曲线的形状及最大吸收波长确定未知物，并从曲线上确定定量测定时的测量波长。
二、吸收池配套性检查
石英吸收池装蒸馏水，以一个吸收池为参比，在选定的测定波长处，调节透射比为100%（A=0.000），测定其余吸收池（参赛选手可以自由选择使用吸收池的个数）的透射比并记录之，作为校正值。
三、未知物的定量分析
根据未知液吸收曲线上测定波长处的吸光度值，确定未知液的稀释倍数，并配制待测溶液。合理配制标准系列溶液(要求工作曲线不少于5个标准点），于定量测定时的测量波长处分别测出其吸光度。以浓度 为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。根据待测溶液的吸光度，从标准曲线上查出未知液的浓度。未知液要平行测定三份，同时做试剂空白。
四、结果计算
根据未知液的稀释倍数，求出未知溶液的浓度。
湄洲湾职业技术学院第六届技能大赛―分析测试技术竞赛
仪器分析操作方法
考题 紫外分光光度法测定未知物
1.仪器
1.1紫外分光光度计(UV 7504-A型)；石英吸收池（1 cm）4只；
1.2容量瓶：100 mL 3个、50 mL 8个；
1.3移液管：刻度吸量管1mL 2支、10 mL 1支，胖肚移液管10 mL 2支；
1.4烧杯100 mL 4个，500 mL 1个。
2.试剂
2.1标准储备溶液：维生素C、水杨酸、硝酸盐氮、苯甲酸（均为1 mg/mL）。
2.2未知溶液：浓度约为45～55 µg/mL。
3.实验操作
3.1 未知物的定性分析
将现场提供的两种标准储备溶液和一种未知溶液均配成浓度约为10 µg/mL的溶液。以蒸馏水为参比，对上述三种溶液于波长200～350 nm范围内，每间隔5或10nm测定（漳州校据现场情况定）一次吸光度，在重要峰值点附近每间隔2（或3nm，漳州校视仪器具体情况，以吸光读读数有差别为原则决定）测定一次吸光度，由测定数据自行绘制吸收曲线。根据吸收曲线的形状确定未知物，并从曲线上确定定量测定时的测量波长。
3.2 吸收池配套性检查
石英吸收池装蒸馏水，以一个吸收池为参比，在选定的测定波长处，调节透射比T为100%（A=0.000），测定其余吸收池的透射比T，（其偏差应小于0.5%，可配成一套使用），记录其余吸收池的吸光度值（A0）作为校正值。
说明：参赛选手可以自由选择使用吸收池的个数。
3.3 未知物的定量分析
根据未知溶液吸收曲线上测定波长处的吸光度值，确定未知液的稀释倍数，并配制待测溶液。合理配制标准系列溶液(要求工作曲线不少于5个标准点。推荐：标准储备液先稀释10倍，配制成100 µg/mL的标准使用溶液），于测定波长处分别测定其吸光度。以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。根据待测溶液的吸光度，从标准曲线上查出未知溶液的浓度。平行测定两次，同时做空白。
4.结果计算
根据未知溶液的稀释倍数，计算未知溶液的浓度。
附：推荐的分析方法
紫外分光光度法测定维生素C的含量
1.仪器
1.1紫外分光光度计(UV 7504-A型)；配石英吸收池(1cm)：4个；
1.2容量瓶：100 mL 3个、50 mL8个；
1.3移液管：刻度吸量管1 mL 2支、10 mL 1支，胖肚移液管10 mL 2支；
1.4烧杯100 mL 4个，500 mL 1个。
2.试剂
2.1维生素C标准溶液(1 mg/mL)；
2.2未知液：浓度约为45～55 µg/mL。
3.实验操作
3.1 吸收曲线的绘制
准确吸取标准溶液1.00 mL，于100 mL容量瓶中，配成浓度约为10 µg/mL的待测溶液，以蒸馏水为参比，于波长200～350 nm范围内测定吸光度，作吸收曲线，从曲线上查得最大吸收波长（265 nm附近）。
吸收曲线参见附图1。
3.2 吸收池配套性检查
石英吸收池装蒸馏水，以一个吸收池为参比，在选定的测定波长处，调节T为100%（A=0.000）），测定其余吸收池的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用，记录其余比色皿的吸光度值作为校正值。
说明：参赛选手可以自由选择使用吸收池的个数。
3.3 标准曲线的绘制
准确吸取维生素C标准溶液10.00 mL于100 mL容量瓶中定容，以此溶液稀释成一系列不同浓度的标准溶液（0～20 µg/mL），于最大吸收波长分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
3.4 样品测定
准确吸2份取样品溶液10.00 mL于50 mL容量瓶中定容，于最大吸收波长分别测出其吸光度，从标准曲线查出样品的浓度。
4.结果计算
根据未知液的稀释倍数，可求出未知溶液的浓度。
5.讨论
维生素C的还原能力强而易被氧化，特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时，溶液的最大吸收波长在245 nm；在pH=12时，溶液的最大吸收波长在300 nm;在pH=5～10范围时，溶液的最大吸收波长在265 nm。
紫外分光光度法测定苯甲酸含量
1.仪器
1.1紫外分光光度计(UV 7504-A型)；配石英比色皿(1 cm)：4个；
1.2容量瓶：100 mL 3个、50 mL8个；
1.3移液管：刻度吸量管1 mL 2支、10 mL 1支，胖肚移液管10 mL 2支；
1.4烧杯100 mL 4个，500 mL 1个。
2.试剂
2.1苯甲酸标准溶液(1 mg/mL)；
2.2未知液：浓度约为45～55 µg/mL。
3.实验操作
3.1 吸收曲线的绘制
准确吸取标准溶液1.00 mL，于100 mL容量瓶中，配成浓度约为10 µg/mL的待测溶液，以蒸馏水为参比，于波长200～350 nm范围内测定吸光度，作吸收曲线，从曲线上查得最大吸收波长（225 nm附近）。
吸收曲线参见附图1。
3.2 吸收池配套性检查
石英吸收池装蒸馏水，以一个吸收池为参比，在选定的测定波长处，调节τ为100%（A=0.000）），测定其余吸收池的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用，记录其余比色皿的吸光度值作为校正值。
说明：参赛选手可以自由选择使用比色皿的个数。
3.3 吸收曲线的绘制
准确吸取标准溶液10.00 mL，于100 mL容量瓶中配成浓度约为10 µg/mL的待测溶液，以蒸馏水为参比，于波长200～350 nm范围内测定吸光度，作吸收曲线，从曲线上查得最大吸收波长（227nm附近）。
吸收曲线参见附图2。
3.4 标准曲线的绘制
准确吸取苯甲酸标准溶液10.00 mL于100 mL容量瓶中定容，以此溶液稀释成一系列不同浓度的标准溶液（0～16 µg/mL），于最大吸收波长分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
3.5 样品测定
准确吸取2份样品溶液10.00 mL于50 mL容量瓶中定容，于最大吸收波长分别测出其吸光度，从标准曲线查出样品的浓度。
4.结果计算
根据未知液的稀释倍数，可求出未知溶液的浓度。
1.仪器
1.1紫外分光光度计(UV 7504-A型)；配石英比色皿(1 cm)：4个；
1.2容量瓶：100 mL 3个、50 mL 8个；
1.3移液管：刻度吸量管1mL 2支、5mL 1支、10 mL 1支，胖肚移液管10 mL 2支；
1.4烧杯100 mL 4个，500 mL 1个。
2.试剂
2.1水杨酸标准溶液(1mg/mL)；
2.2未知液：浓度约为45～55 µg/mL。
3.实验操作
3.1 吸收曲线的绘制
准确吸取标准溶液1.00mL，于100mL容量瓶中配成浓度约为10 µg/mL的待测溶液，以蒸馏水为参比，于波长200～350 nm范围内测定吸光度，作吸收曲线，从曲线上查得最大吸收波长（230 nm或296 nm附近）。
吸收曲线参见附图1。
3.2 吸收池配套性检查
石英吸收池装蒸馏水，以一个吸收池为参比，在选定的测定波长处，调节τ为100%（A=0.000），测定其余吸收池的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用，记录其余比色皿的吸光度值作为校正值。
说明：参赛选手可以自由选择使用比色皿的个数。
吸收曲线参见附图3。
3.3 标准曲线的绘制
准确吸取水杨酸标准溶液10.00 mL于100 mL容量瓶中定容，以此溶液稀释成一系列不同浓度的标准溶液（测定波长230 nm附近的0～10 µg/mL，测定波长296nm附近的0～20 µg/mL），于最大吸收波长分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
3.4 样品测定
准确吸取2份样品溶液5.00 mL或10.00mL于50 mL容量瓶中定容，于最大吸收波长分别测出其吸光度，从标准曲线查出样品的浓度。
4.结果计算
根据未知液的稀释倍数，可求出未知溶液的浓度。
附图1:
附图2:
附图3:
